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本文目录一览：

• 1、实验笔记丨CRISPR-dCas9实验步骤详解
• 2、淘宝白黒号是什么意思?黑号有何影响?
• 3、闲置的沃尔玛购物卡哪里回收?
• 4、今年几月几号白露2023
• 5、淘宝黑号了多久才能白回来
• 6、沃尔玛购物卡不想使用可以回收吗?

实验笔记丨CRISPR-dCas9实验步骤详解

载体酶切 准备灭菌的PCR离心管，配制酶切体系，放置PCR仪，孵育3小时，终止酶切后使用1%琼脂糖凝胶电泳进行鉴定。琼脂糖凝胶DNA回收 将吸附柱置于收集管中，加入Buffer BL，离心活化硅胶膜；在紫外灯下，用刀片切下目的条带，尽量去除非目的DNA，确保体积最小。

sgRNA长度：SpCas9一般为20nt。 sgRNA序列碱基组成：基因特异的sgRNA模板序列位于PAM序列前，PAM序列特征为NGG （N为任意核苷酸），选择3末端含有GG的sgRNA，可构成PAM序列。sgRNA序列应避免以4个以上的T结尾，GC含量最佳为30%-70%（40%-60%）。

实验流程介绍 天然的CRISPR-Cas9系统由三部分组成：SpCas9 （简称Cas9）、crRNA、tracrRNA。tracrRNA（在CRISPR-Cas9编辑技术中被优化并命名为gRNA scaffold），它负责与Cas9结合，与重复序列具有同源性。crRNA为引导序列，约20个碱基，具有特异性。

前阵子才写道 ： CRISPR-Cas9基因敲除实验步骤 Month 4 --可能的收官之帖（但还远未结束） 说自己收官之作，哪里想到这么快就要继续开始新的实验了。

CRISPR/Cas9实验流程包括sgRNA设计，这一关键步骤确保实验的成功。设计原则主要聚焦于20nt靶点的II型CRISPR系统（如SpCas9），确保sgRNA序列的碱基组成（基因特异性模板序列前）遵循NGG（N为任意核苷酸）的PAM序列规则。避免sgRNA序列以4个以上的T结尾，同时保持GC%含量在30%-70%。

基本的HDR机制包括几个步骤： （1）DSB每侧的DNA在5 - 3个方向上被切除（DNA被解开，5个部分被切除），导致每个断端上有3个悬垂。（2）然后通过一种叫做RPA的蛋白稳定单链外挂，并与Rad51重组酶蛋白（每个形成核蛋白丝）结合。

淘宝白黒号是什么意思?黑号有何影响?

淘宝白号就是注册出来之后没有买过东西的，也就是没有点数的号，一般买过东西之后得到卖家的好评之后就会有点数，那个时候就已经不是白号了，白嘛就是干干净净的那种，但是现在的意思有点不一样，好像只要不是1心的都叫做白号吧。黑号：所谓黑号，在淘宝官方并没有这一规则和定义。

淘宝白号是指淘宝账号的一种状态，即该账号没有任何违规记录，权重较高，可以享受淘宝平台的一些优惠政策和服务。淘宝白号与黑号相对，黑号通常是因为账号存在违规行为，如刷单、恶意评价、售假等行为，被淘宝平台标记并限制其部分功能或降低其权重。

淘宝白号就是没有购买、信誉、实名的账号。黑号就是频繁参与虚假交易、钻淘宝系统bug、退款、购买白菜单等等，导致被淘宝监控的账号。

淘宝黑号就是：购买记录很异常，突然一个月暴涨了很多消费，而且购买的东西都是很混乱的，和小号标签根本匹配不起来，所以淘宝黑号就会被淘宝监控，数据异常，淘宝就会判定是虚假交易的。跟星级没有直接的关系的。淘宝小号分成黑号和白号。

黑号说白了就是降权号，有违规记录，反之没有的则为白，查询黑号或白号，可以上亲查查官网查，不用太过纠结黑白号的定义。

淘宝黑号指的是那些因频繁违规操作而导致账号异常的用户。这类用户会遇到无法获取优惠券、无法参与促销活动等麻烦。值得注意的是，目前淘宝官方并没有明确的规定和定义来界定黑号。对于轻微违规的用户，淘宝会给予恢复机会；而对于严重违规的用户，其账号将永久无法恢复，并且无法进行正常的商品购买。

闲置的沃尔玛购物卡哪里回收?

1、通过门店回收 前往最近的沃尔玛门店：找到您附近的门店，并前往客服中心。咨询沃尔玛购物卡回收政策：与客服人员沟通，了解沃尔玛购物卡回收的具体政策和操作流程，包括可能涉及的手续费或回收时间。通过朋友或亲戚转让 找到接手人：在您的亲友圈中寻找对沃尔玛购物卡有需求的人。

2、通过沃尔玛门店或官方网站回收：您可以直接携带不需要的购物卡前往沃尔玛门店进行回收，门店工作人员会在系统中验证购物卡的有效性后进行回收处理。通过线上回收平台回收：线上回收是一种便捷的方式。您可以选择一些专业的线上卡券回收平台，如京顺回收、卡小白等。

3、沃尔玛购物卡可以通过多种方式进行回收。以下是一些主要的回收方法：线上回收平台 微信小程序或公众号 线下回收点：如果您不太熟悉网络操作，可以选择线下回收。在沃尔玛线下门店附近，可能会发现一些专门的沃尔玛购物卡回收点 。

今年几月几号白露2023

年白露时间：9月8日5点26分31秒，星期五，农历七月廿四。白露基本结束了暑天的闷热，天气渐渐转凉，寒生露凝。古人以四时配五行，秋属金，金色白，以白形容秋露，故名“白露”。白露三候 我国古代将白露分为三候：“一候鸿雁来；二候玄鸟归；三候群鸟养羞。

年白露时间：9月8日05：26：31，星期五，农历七月廿四。白露节气，大部分地区温度降低。白露是秋天的第三个节气，表示孟秋时节的结束和仲秋时节的开始。这时，人们就会明显地感觉到炎热的夏天已过，而凉爽的秋天已经到来了。

年白露开始时间：09月08日05：26：31，星期五，农历七月廿四；2023年白露结束时间：09月23日14：49：46，星期六，农历八月初九。白露是农历二十四节气之一，当太阳到达黄经一百六十五度时为白露节气。白露是秋天的第三个节气，表示孟秋时节的结束和仲秋时节的开始。

白露是秋季的节气，2023白露公历时间：9月8日5点26分31秒，农历七月廿四号，星期五。白露是秋季的第三个节气，属于孟秋时节的结束和仲秋时节的开始，也就是开始进入秋天中期。这个时候夏季的暑热才是真正消散，寒气渐深，温差变大。

年白露时间：2023年9月8日05：26：31，农历七月廿四。白露，干支历申月的结束与酉月的起始。斗指癸；太阳达黄经165度；于公历9月7-9日交节。白露节气，是反映自然界寒气增长的重要节气。由于天气逐渐转凉，白昼有阳光尚热，但傍晚后气温便很快下降，昼夜温差大。

年白露时间：9月8日5点26分31秒，星期五，农历七月廿四。

淘宝黑号了多久才能白回来

如果您的账号被标记为黑号，只需恢复正常购物行为即可。通常情况下，经过一年左右的时间，账号便有机会恢复正常状态。特别是当您进行大额交易时，使用黑号进行购买，这可能会加速账号的恢复过程。如何判断自己是否账号已被标记为黑号？一个显著的迹象是淘气值出现大幅度下降。

淘宝黑号了一年才能白回来。淘宝黑号转白号的方法其实挺简单的，就是不要参加或者违法活动，然后正常购物，一年之内就可以转白。淘宝黑号官方是没有具体规定的，如果想要恢复需要一系列操作，一般情况下黑号是无法进行恢复的。淘宝变成黑号后，无法领取优惠券，秒杀活动也无法参加，积分也会变得比较少。

天左右。黑号只要不继续参与补单或者违规活动，正常购物，一年左右能转白，有些情节不是很严重的遇上双11或者双12可能会特赦一批。要适当保养小号，如果还是一如既往这么像个刷手一样使用这些小号，迟早都会封掉的。淘宝黑号多久能白回来？365天左右。

所谓黑号，在淘宝官方并没有这一规则和定义。淘宝买家黑号永久不会恢复，轻微的帮助朋友刷单封店，严重的黑号，直接不能购买商品。淘宝网（taobao）是阿里巴巴集团旗下的网购零售平台，由马云于2003年5月在浙江杭州创立，是亚洲最大购物网站。

沃尔玛购物卡不想使用可以回收吗?

1、通过沃尔玛门店或官方网站回收：您可以直接携带不需要的购物卡前往沃尔玛门店进行回收，门店工作人员会在系统中验证购物卡的有效性后进行回收处理。通过线上回收平台回收：线上回收是一种便捷的方式。您可以选择一些专业的线上卡券回收平台，如京顺回收、卡小白等。

2、可以，人们可以于“京回收平台”这里实现沃尔玛购物卡的回收变现。

3、综上所述，沃尔玛购物卡是可以回收的，沃尔玛购物卡回收方式有很多，方法也很简单，常用的回收方法是线上回收，在选择时，务必注意平台的信誉度、回收价格、用户评价等因素，确保安全可靠。

4、沃尔玛购物卡可以回收。沃尔玛购物卡是一种不记名的预付卡，既可以线下使用，也可以线上使用，回收沃尔玛购物卡可以减少资源浪费，也能为持卡人带来一笔可观的收入。关于沃尔玛购物卡的回收方式，主要有以下几种途径：选择卡券回收平台：例如，你可以通过京顺回收公众号进行回收。

5、沃尔玛卡可以通过官方渠道进行回收，包括在沃尔玛门店服务台办理退卡，或通过沃尔玛的官方线上平台提交回收申请。详细 沃尔玛购物卡是一种预付费卡，允许持卡人在沃尔玛商店购物。然而，当卡片余额用尽或者持卡人不再需要该卡时，可以通过沃尔玛提供的官方渠道进行回收。

6、沃尔玛超市卡确实是一种可以进行回收的购物卡，大多数消费者手中的沃尔玛超市卡都是可以进行回收的，但是，小部分消费者手中的沃尔玛超市购物卡是不能进行回收的。